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      首页产品分类目录分子生物免疫诊断→Glue活化辣根过氧化物酶(B 型)---2小时快速标记抗原、抗体、多肽及化学小分子

      Glue活化辣根过氧化物酶(B 型)---2小时快速标记抗原、抗体、多肽及化学小分子

GalaxyBio Code包装规格价格说明书购物车
WB2205B32ugx5200元
WB2205B32ugx10320元
WB2210B64ugx5200元
WB2210B64ugx10320元
MD010B1mgx51500元
MD010B1mgx102500元
MD020B3mgx32200元
MD020B3mgx53200元
MD020B3mgx106000元
MD050B50mg11000元
MD100B100mg20000元

产品简介

Glue

活化辣根过氧化物酶

(B 型)

货号

规格

(HRP/支)

数量

(支)

价格

标记抗体的量/支

(160KDIgG为标准)

Cat:WB2205B

32ug

5

200

约5 ug/支

 

10

320

Cat:WB2210B

64ug

5

200

约10ug/支

 

10

320

Cat:MD010B

1mg

5

1500元

约100ug~0.5mg/支

10

2500元

Cat:MD020B

3mg

3

2200元

约300ug~1.5mg /支

 

5

3200元

10

6000元

Cat:MD030B

10 mg

1

2200元

约1~4mg /支

Cat:MD040B

100 mg

1

20000元

约10~50mg mg/支

Cat:MD050B

50 mg

1

11000元

约5~25mg mg/支

 

贮存条件:

低温运输,-20℃贮存,有效期一年。

生产日期:见包装

产品简介     

※  Galaxybio 公司研发的活化HRP,对优质辣根过氧化物酶次序偶联,再活化,使辣根酶富含活性基团。一经活化的HRP,极易和含氨基NH2的小分子或蛋白氨基NH2的共价结合。因此使用本方法标记物,具有标记率高、活性好、本底低及非常敏感等特点。敏感性一般是传统过碘酸法标记3~5倍。微量包装的活化HRP,特别适合科研用的昂贵抗体的标记。也适合抗体抗原活性的检测。

※  一步标记,简便快速。与待记抗原或抗体混合后(约12个小时过夜标记或37℃2小时。)

※  可以微量标记,节省昂贵的抗原抗体

※  无需透析,即时使用;

※  标记率极高,可大于95%;敏感性一般是传统过碘酸法标记3~5倍。

※  本试剂盒针对氨基进行标记,故只对含有氨基的分子。可以进行抗原或其他蛋白的标记。小分子的标记,如瘦肉精、DNA、多肽等等,标记时,如要提高HRP的利用率,可以加入过量的小分子,然后透析除去游离的小分子;如果要即时使用,参考蛋白抗原的标记,减少小分子的用量,从而减少游离的小分子。

※  本底远远低于其它方法。

注意事项:

1. 抗原抗体如果是存在于硫酸铵、甘氨酸或Tris缓冲液中,需以PBS缓冲液充分透析,也可以超滤离心管进行超滤;微量的含NH2 的小分子,会严重影响标记率。

2. 反应体系一般100μl~300ul /1mgHRP;太小,可能发生自身交联;也不要太大,太大会影响标记率

3. REAGENT Ⅲ 终止液,封闭残余活化基团。

4. 注意反应 pH值约维持在9.5左右。pH值太低,多加反应启动剂。

 

5.特别提醒,是后续试验中,酶标板条种类不同,本底差异特别大。当本底高时,以较高浓度蛋白溶液封闭的酶标板,同时把酶标稀释液的蛋白浓度加大。如果问题依旧存在,请联系我们技术咨询。

6 本试剂仅用于科学研究;

操作步骤

以1mg活化HRP,标记抗体为例(反应体系根据HRP的mg数相应增加)

        1. 准备待标记物:以蒸馏水或超纯水把待标记物溶解成约1mg/ml。

2. 取100ul抗体溶液(1mg/ml)转入REAGENT Ⅰ活化辣根氧化物酶。

※简短离心,使辣根过氧化物酶沉到管底,辣根酶管壁上的干粉HRP要完全冲洗溶解。

※总的反应体系控制在100ul/mg活化HRP左右,体系增大影响标记率。

※按照按mg活化HRP对应抗体100ug~500 ug、抗原50ug~250ug,HRP:X的分子mol比保持在30:15~1左右。

3. 以REAGENTⅡ调pH值至9.5左右(大约10ul,因抗体用的缓冲液的差别,量有所不同,但确保PH在9.0以上,可以多加REAGENTⅡ,并准确记录REAGENTⅡ的使用量,以备下一步用)。 37℃2小时、或4℃过夜。 

※检测PH的方法:取一新管尖,吸取标记物溶液,然后排尽液体,拿管尖点在PH试纸上,比对即可。

4. (备选步骤)加入微量硼氢化钠。(适合酶标物长期放置的,即时使用无需添加。取200ul的枪头,插入硼氢化钠粉末,在管尖处有看得见白色粉末,再转移到酶标物物,吹打溶解混匀即可)。

5. 加入REAGENTⅢ(约3倍体积的REAGENTⅡ。例如上一步用去REAGENTⅡ10ul,这一步加入REAGENTⅢ30~50ul。但确保酶结合物PH在7.0左右,可以多加REAGENTⅢ调整),混匀终止反应。

6. (备选步骤,甘油能更好稳定酶结合物活性)加甘油至50%,-20℃保存。

注:如果抗原(或抗体)为溶液状态,从步骤2开始操作。

特别提醒:后续试验中,酶标板条种类不同,本底差异特别大。当本底高时,以较高浓度蛋白溶液封闭的酶标板,同时把酶标稀释液的蛋白浓度加大,增加洗涤次数。如果问题依旧存在,请联系我们技术咨询。

推荐使用:包被了蛋白、或抗原、或抗体的酶标板的稳定,和稀释液的抗原或抗体的稳定,请购买本公司的相关产品。底物显色,本公司提供单组分TMB

和双组分TMB AB液,4~8℃可稳定数年。

 

附带缓冲液清单:

 

REAGENT Ⅰ活化辣根过氧化物酶

见包装

REAGENT Ⅱ反应启动剂

1.0ml(PH9.6)

REAGENT Ⅲ 终止液

1.0ml(PH7.0)

硼氢化钠

少许。

说明书

1份

 

 

 

Glue A型和B型活化辣根过氧化物酶标记特点

 

Glue A

Glue B

标记速度

快、1小时可完成标记

同A

标记条件控制

容易

同A

标记效果

很好

同A

 

 

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